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原理:
Hanna 鈣離子試劑中含有Zn-EGTA、zincon(紅色指示劑)、及buffer
當溶液中含有鈣離子時,會與EGTA競爭,形成Ca-EGTA
進而釋放出Zn,Zn可與指示劑形成藍色錯合物
Ca + Zn-EGTA + zincon(red) ---> Ca-EGTA + Zn-zincon(blue)


顏色變化
PH84_F_11_130415105343.JPG


成分:
1mL試劑A中含有
(1) Buffer:控制pH在9.5,內含Sodium tetraborate、NH4Cl、NaOH
(2) Zn-EGTA
試劑B粉末:zincon指示劑,為紅色,可與Zn形成藍色錯合物


注意波長變化,因此蛋蛋選擇了610nm的波長
PH84_F_11_130415105343_1.JPG


參考資料
Ann. Clin. Biochem. 1987, 24, P591
台北榮總圖書館有
 
影響準確因素
Hanna Ca這個方法,需注意的事項比較多

1. 取0.1ml海水的準確度
由於此方法用的是稀釋法,假設取0.1ml測得海水鈣離子為400ppm
那麼取0.15ml海水,將會測得鈣離子為600ppm
因此如不能精確取得0.1ml體積,過多或過少體積將造成正偏差及負偏差。
以下用針筒取十次0.1ml體積,看看實際體積的偏差
(假設0.1ml海水含有400ppm鈣離子)

PH84_F_11_130415111122.JPG


看Hanna示範影片,有時會加塑膠尖頭或者沒加塑膠尖頭
看來有加塑膠尖頭,會準一些些

因此若情況許可,建議用pipetman取海水
PH84_F_11_130415111122_1.JPG


2. 去離子水純度
去離子水中,其Ca、Hg、Ba、Sr、Zn離子含量需小於0.01ppm,否則會造成正偏差。
 

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